Cromatografía gaseosa
La cromatografía gaseosa es una técnica muy antigua empleada para separar físicamente sustancias presentes en mezclas complejas de compuestos fácilmente volatilizables. La muestra se volatiliza en el inyector y luego se introduce en la columna capilar dentro del horno. La columna contiene recubrimientos en la pared que cumple la función de la fase estacionaria. La muestra volatilizada es arrastrada por un gas llamado “carrier” (fase gaseosa) que generalmente es He, Ar o N2.
La separación se logra debido a la interacción diferenciada de los componentes de la muestra con las fases presentes: la fase estacionaria y la fase gaseosa. Los compuestos que presentan mayor interacción con la fase estacionaria recorrerán más lentamente la columna saliendo de ella a mayor tiempo de elución. Por el contrario, los componentes con menor afinidad por la columna, como también el gas carrier, saldrán primero de la columna y tendrán, por lo tanto, los menores tiempos de retención (intervalo de tiempo en que el analito se encuentra en la columna).
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Actividades que se realizan
Cromatógrafo Gaseoso
- Determinación de la composición del gas de síntesis proveniente de la Gasificación de compuestos carbonosos y biomasa.
- Determinación del contenido de CO y CO₂ de tubos de buceo.
- Identificación de gases de efecto invernadero en muestras provenientes de invernaderos artificiales en campo.
Cromatógrafo Gaseoso acoplado a Espectrometría de Masa
- Cuantificación del contenido de algunos terpenos en muestras de pinos sometidos a diferentes condiciones de crecimiento.
- Identificación de compuestos en volátiles provenientes de la pirólisis de compuestos carbonosos y biomasa.
- Seguimiento del proceso de remediación con microorganismos identificando el contenido de gasoil en suelos de la Antártida.
- Identificación de compuestos emitidos por un hongo transmitido por la avispa Syrex a especies de pinos.
Equipamiento
- Cromatógrafo Gaseoso con Espectrometría de Masa, Clarus 680/600T, Perkin Elmer.Detectores: TCD, FID y MS. Accesorios: Metanizador, Válvula muestreadora de gases y Conector en serie TCD-FID.
Este equipo tiene la posibilidad de emplearse solamente como Cromatógrafo Gaseoso (GC) o puede combinarse en serie con un detector de Espectrometría de Masa (MS).
Cuando se emplea el equipo solamente como Cromatógrafo Gaseoso, se puede utilizar el Detector por Ionización Llama (FID) o el Detector de Conductividad Térmica (TCD) para identificar la presencia de los componentes eluidos al salir de la columna. Las sustancias detectadas se observan como picos en un gráfico donde se representa la señal del detector en función del tiempo de elución (Cromatograma). La identificación del compuesto se logra haciendo corridas con las mismas condiciones experimentales de sus correspondientes patrones o empleando una base de datos con los tiempos de retención de los compuestos posibles. La cuantificación se consigue calculando el área o el alto de cada pico y realizando la curva de calibración con patrones externos. Esta identificación es rara vez absoluta, generalmente es imprecisa o no es posible hacerla con todos los compuestos.
En contraste con el GC, un espectrómetro de masa (MS) no es utilizado para tratar mezclas. Si se introduce una sustancia pura en el MS, su espectro de masa permite identificarlo unívocamente, empleando un método de ionización apropiado. Con este equipo se puede realizar una identificación positiva de una sustancia o la confirmación de su estructura molecular. En cambio, si se coloca una mezcla de sustancias, el espectro de masa será la suma de todos los espectros de los compuestos presentes y será imposible identificarlos.
Combinando ambos métodos se obtiene un sistema llamado Cromatógrafo Gaseoso con detector de Espectrometría de Masa (GC/MS) capaz de separar, identificar y cuantificar las mezclas complejas, siempre que los componentes puedan ser volatilizados.
- Cromatógrafo Gaseoso, SRI 8610C Shimadzu. Detectores: TCD y FID. Accesorios: Metanizador, válvula muestradora de gases y Conector en serie TCD-FID.
Este equipo cuenta con dos detectores conectados en serie a la salida de la columna de separación. Por un lado, el Detector de Conductividad Térmica (TCD, por las siglas en inglés de Thermal Conductivity Detector) es un detector universal no destructivo que responde en un rango entre 0,01 y 100%, dependiendo de la diferencia de conductividad térmica de los analitos con el gas carrier. Por otro lado, el Detector de ionización por llama (FID, por Flame Ionization Detector) que combustiona los compuestos orgánicos en una llama de hidrógeno. Los gases como CO y CO₂ requieren de una metanización previa a la combustión en el FID.